Berriak

Une honetan Javascript desgaituta dago zure arakatzailean.Webgune honen eginbide batzuek ez dute funtzionatuko JavaScript desgaituta badago.
Erregistratu zure datu zehatzekin eta interesa duen droga zehatzarekin, eta ematen duzun informazioa gure datu-base zabaleko artikuluekin lotuko dugu eta PDF kopia bat bidaliko dizugu berehala.
Ding Jingnuo, Zhao Weifeng, Gaixotasun Infekziosoen Saila, Suzhou Unibertsitateko Lehen Afiliatua Ospitalea, Suzhou hiria, Jiangsu probintzia, 215000 Tel.digestio-aparatuko tumoreak 5 urteko biziraupen orokorra %14,1ekoa.HCC duten paziente asko fase aurreratuan diagnostikatzen dira, beraz, baheketa goiztiarra ezinbestekoa da HCCren hilkortasuna murrizteko.Gehien erabiltzen diren detekzio-adierazleez gain, hala nola serum alfa-fetoproteina (AFP), lentearen lektina erreaktiboa alfa-fetoproteina (AFP-L3) eta protrombina anormala (K bitamina-gabeziak eragindako proteina II, PIVKA-II), fluidoen biopsia teknikak. HCC detektatzeko balio diagnostikoa duela frogatu da.Prozedura inbaditzaileekin alderatuta, fluidoen biopsiak zirkulatzen duten metabolito gaiztoak hauteman ditzake.Fluido-biopsia-teknikek tumore-zelulak, zirkulatzen duten tumorearen DNA, zirkulatzen duten RNA eta exosomak detektatzen dituzte eta HCCren baheketa, diagnostiko eta pronostikorako ebaluazio goiztiarra egiteko erabiltzen dira.Artikulu honek biologia molekularra eta fluidoen biopsia-tekniken aplikazioa berrikusten du, arrisku handiko HCC taldeen baheketa goiztiarra hobetzeko aukera bideragarriak izan daitezkeen biomarkatzaile itxaropentsuak isolatzeko.Gako-hitzak: fluidoen biopsiaren teknika, kartzinoma hepatozelularra, arrisku handiko taldea .
Kartzinoma hepatozelularra (HCC) digestio-aparatuko tumore gaizto arrunta da, gizonezkoen zein emakumezkoen tumore gaiztoen kasu berrien artean seigarren postuan kokatuta.1 Mundu osoan, gibeleko minbizia minbiziaren heriotzaren hirugarren kausa da biriketako eta kolore-onteko minbiziaren atzetik, eta minbiziarekin lotutako heriotzen % 8,3 dira neoplasia gaizto guztien ondorioz.1 HCCaren pronostikoa oso lotuta dago diagnostikoko fasearekin.HCCn biziraupen eskasaren arrazoi nagusiak gibel barneko metastasiak, atari-benetako tumorearen tronboak eta erresekzioa galarazten duten urrutiko metastasiak dira, eta ezaugarri horietako asko pazienteetan daude dagoeneko diagnostikoa egiteko unean.
Diagnostiko- eta tratamendu-jarraibideetan oinarrituta, HCC garatzeko arrisku-faktore nagusiak gibeleko zirrosia, B hepatitisaren birus kronikoa (HBV) edo C hepatitisaren birusaren (HCV) infekzioa, gibel gantz alkoholikoaren gaixotasuna eta gibel gantz ez alkoholikoa (NAFLD) dira. ).2 Horrez gain, HCCren arrisku-faktoreak honako hauek dira: aflatoxinek kutsatutako elikagaien ingesta, eskistosomiasia, zirrosiaren beste arrazoi batzuk, gibeleko minbiziaren familiako historia, diabetesa, obesitatea, erretzea eta sendagaiek eragindako gibeleko lesioa.Arrisku handiko 35 eta 45 urteko taldeek aldizkako azterketa medikoak egin beharko lituzkete.Baheketa goiztiarra tratamendu goiztiarreko estrategia garrantzitsua da HCC duten pazienteen biziraupen orokorra hobetzeko.
AFP, AFP-L3 eta PIVKA-II bezalako biomarkatzaileak gomendatzen dira HCC3,4 baheketa goiztiarra egiteko.Biopsia likidoaren teknikek emaitza itxaropentsuak erakutsi dituzte diagnostiko goiztiarran eta tratamenduaren ebaluazioan.5,6 HCC likidoaren biopsian aurrerapen garrantzitsuak egin dira, eta horrek AFP bezalako serum-markatzaileak baino sentikortasun eta espezifikotasun handiagoa izan dezake (1. taula).
AFP HCCn oso erabilia den biomarkatzailea da eta gaur egun gaixotasunaren baheketa, diagnostiko eta ebaluazio goiztiarreko biomarkatzaile zehatzena da.AFP maila etengabe altxatua HCCren progresiorako arrisku-faktoretzat hartzen da.7,8 Kartzinoma hepatozelular txikiaren (sHCC) detekzio-tasa areagotzen ari da ultrasoinuak eta ordenagailu bidezko tomografia garatzen direnean, eta AFPk praktika klinikoan hHCC detektatzeko bereziki ez duela ikusi da.Atzera begirako zentro anitzeko azterketa baten arabera9, AFP positiboa aurkitu zen HCC kasuen %46an (616/1338) eta sHCC kasuen %23,4an (150/641).Horrez gain, gibeleko gaixotasun kronikoa eta zirrosia duten pazienteetan AFP maila altua da.10 Beraz, AFPk baheketa efektu mugatua du sHCCrako.11 Asia-Ozeano Bareko Kartzinoma Hepatozelularentzako Praktika Klinikoaren Gidalerroen arabera, AFP erabiltzea ez da gomendagarria.12 Ebidentzia klinikoek iradokitzen dute PIVKA-II AFP baino handiagoa dela HCCaren tratamenduan eta PIVKA-II eta AFP konbinazioak izan duela. diagnostiko-balio handiagoa HCCn.13 Ehunen biopsiarekin alderatuta, fluidoen biopsiak tumoreari lotutako metabolitoak detektatzen ditu batez ere gorputz-likidoetan (odola, listua, pleura-likidoa, likido zefalorrakidea edo gernua) eta ez da hain inbaditzailea ehunentzat.14 Gainera, biopsia likidoek tumore primarioko ehunetan ez dauden ezaugarri gaiztoak isla ditzakete.15 Biopsia likidoak oraindik ez dira probatzen praktika klinikoan tumore mota guztietarako, baina minbizian duten diagnostiko ahalmena onkologoen arreta erakartzen ari da.16 Fluido-biopsiak zirkulatzen duten tumore-zelulak (CTC), zirkulatzen duten tumorearen DNA (cDNA), zirkulatzen duten RNA librea (ecRNA) eta exosomak detekta ditzake.Artikulu honetan, arrisku handiko HCC taldeen baheketa goiztiarrean fluido-biopsia-tekniken ezaugarriak, eginkizuna eta aplikazioa eztabaidatuko dugu.
Gizabanako osasuntsuen odol laginetan zelula kanpoko DNA (cfDNA) 1948an deskribatu zuten lehen aldiz Mandel et al.17 cfDNA zelularik gabeko DNA zati bat da, gutxi gorabehera 160-180 bp luzera, batez ere linfozitoetatik eta zelula mieloideetatik sortua.ctDNA tumore-zelulek odol periferikora askatzen duten DNA-zati mutante espezifiko bat da, tumore-zelulen informazio genomikoa irudikatzen duena prozesu fisiopatologiko jakin batzuen ondoren, nekrosia, apoptosia eta iraizpena barne.cfDNA guztirako ctDNA-ren proportzioa asko aldatzen da tumore motaren arabera, eta cDNA zatiek normalean 167 bp-ko luzera baino txikiagoak izaten omen dituzte.18 Underhill-en azterketak erakutsi zuen cfDNA zatiak, oro har, cfDNA normalak baino laburragoak direla.19 Pertsona osasuntsuekin alderatuta, minbizi-gaixoen odolean cfDNA zatien luzera osoa laburragoa da, beraz, cfDNA tumoreen baheketa goiztiarraren adierazle gisa erabil daiteke.cfDNA zatien luzera batzuen azpimultzo batzuen aberastea hobetu daiteke tumore solido ez-metastasikoekin lotutako cDNA detektatzea.Ikerketek frogatu dute ctDNA pankreako, koloneko, maskuriko, urdail-hesteetako, gibeleko, obarioko, bularreko, melanomaren eta buruko eta lepoko minbizien % 75 baino gehiagotan aurkitzen dela.20,21 Hala ere, odoleko ctDNA kopurua tumorearen kokapenaren araberakoa da.22 Bettegoud-ek egindako ikerketa batean, kolorektaleko, bularreko, gibeleko, biriketako eta prostatako minbizia duten pazienteek odolean beste minbizi batzuek baino cDNA maila handiagoak dituztela aurkitu dute.Aitzitik, ahoko minbizia, pankreako minbizia, urdaileko minbizia eta glioma duten pazienteetan, odoleko cDNA kontzentrazioa txikiagoa izan zen.hogeita bat
ctDNA tumore-zelulen mutazio genetiko berberak dituenez, cDNA erabil daiteke tumoreari buruzko mutazio heterogeneoak eta aldaketa epigenetikoak detektatzeko, besteak beste, metilazioa, hidroximetilazioa, nukleotido bakarreko aldakuntzak eta kopia-zenbakien aldakuntzak.hogeita hiru
DNAren metilazioa geneen errepresioa eragiten duen aldaketa epigenetiko ohikoenetako bat da.Zelula normalekin alderatuta, tumore-zelulen genomaren metilazio-maila orokorrean desberdintasunak daude, batez ere tumore-zapaltzaileen geneen metilazioan, eta horrek hasierako fasean detektatu daitezke, eta horrek iradokitzen du DNAren metilazioan aldaketak hasierako adierazle izan daitezkeela. tumorigenesiaren detekzioa.HCC-rekin lotutako tumore zapaltzaileen geneak sustatzaileen metilazioaz inaktiba daitezke, eta, ondorioz, tumorigenesia estimulatzen du.24 DNA metilazioa markatzaile aproposa da tumoreen diagnostiko goiztiarra egiteko, ehunen espezifikotasunagatik, detektagarritasunagatik eta adinaren independentziagatik.Horrez gain, DNAren metilazioa ohikoagoa da mutazio somatikoekin alderatuta, xede-eskualde gehiago eta CpG-ko gune alteratuak daudelako xede-genomaren eskualde bakoitzean.25 CpG gune anitzez gain, ctDNAn hipermetilatutako loci independente ugari identifikatu dira DBX2, THY1, MT1M, INK4A, VIM, FBLN1 eta RGS10.26 Xu et al.1098 HCC pazienteen eta 835 kontrol osasuntsuren cfDNA laginak alderatuz gero, HCCrekin lotutako geneek dagozkien plasmako cDNA metilazio sinadurekin oso erlazionatuta zegoela aurkitu zen.25 Laborategiko analisietan oinarrituta, 10 metilazio-markatzaile zituen iragarpen-eredu bat garatu zen, hurrenez hurren, %85,7ko eta %94,3ko sentsibilitatea eta espezifikotasuna dutenak, eta markatzaile horiek oso erlazionatuta zeuden tumore-masarekin, tumore-fasearekin eta tratamenduaren erantzunarekin.Emaitza hauek adierazten dute cDNA metilazio-markatzaileen erabilerak itxaropen handia duela HCCren diagnostikoan, jarraipenan eta pronostikoan.Lu et al27-k aurkeztutako hiru gene aberrantez metilatutako hiru (APC, COX2, RASSF1A) eta miRNA bat (miR203) osatutako metilazio-ereduan, HBVri lotutako HCC diagnostikatzeko 27 ereduaren sentikortasuna eta espezifikotasuna konparagarriak ziren.%80.Gainera, ereduak diagnostikatu gabeko HCC pazienteen % 75 detektatu dezake 20 ng/mL-ko AFP maila duten.Ras-asoziatutako domeinu-familiako 1A proteinaren (RASSF1A) genea da giza genoman errepikatzen den DNAren sekuentzia nagusia.Araujo et al.ondorioztatu zuen RASSF1A sustatzailearen hipermetilazioa biomarkatzaile baliotsua izan daitekeela HCCren baheketa goiztiarrako eta terapia epigenetikorako helburu molekular potentziala izan daitekeela.28 Ikerketa batean, serum RASSF1A sustatzaileen hipermetilazioa aurkitu zen HCC duten pazienteen % 73,3tan.29 Luze tartekaturiko nukleotidoen 1. elementua (LINE-1) erretrotransposizio bitartekari oso aktiboa da.LINE-1 hipometilazioa HCC serum laginen % 66,7ko DNAn aurkitu zen eta erresekzio erradikalaren ondoren errepikapen goiztiarrarekin eta biziraupen eskasarekin lotu zen.29 Hipermetilazioa prozesu genetiko arrunta da, gibeleko zirrosiaren eta HCCaren garapenean paper berezia betetzen duena.30 Aitzitik, hidroximetilazioa geneen berraktibazioa eta adierazpena eragiten duen desmetilazio-prozesua da, eta prozesu horretan 5-hidroximetilzitosina (5-hmC) produktua detektatuz tumore bat identifikatzeko erabil daiteke.cDNAren metilazioa eta hidroximetilazioa tumorigenesiarekin lotuta daude eta HCCren baheketa goiztiarrari lagun dezakete.2554 subjekturen azterketa batean, cfDNA laginetan genoma osoko 31 5-hmC aurkitu ziren, eta 32 gene identifikatu ziren HCC gaixoen 5-hmC sekuentziak eta gaixotasun kronikoak dituztenen bezalako arrisku handiko taldeetan alderatuz.Gibeleko gaixotasunen diagnostiko ereduak.eta zirrosia.Eredu hau AFP baino handiagoa zen HCC ehun ez-tumoraletik bereizteko.
Kodetze-eskualdeetako mutazioek transkripzio-anomaliak ekar ditzakete, proteina-sekuentzietan aldaketak eta azken finean minbizia ekar dezakete.Nukleotido bakarreko aldaerak markatzaile genomiko garrantzitsuak dira tumoreen baheketa goiztiarra egiteko, ehunen fidagarritasun handiagatik eta tumore eta ehunen espezifikotasun handiagatik.Minbiziaren exoma eta genoma osoa sekuentziatzeko hurrengo belaunaldiko sekuentziazioa (NGS) erabiliz HCCrekin lotutako ikerketa ugarik identifikatu dituzte mutazio zelular gene arruntak, hala nola TP53 eta CTNNB1, baita ARID1A, MLL, IRF2 barne.Gene berriek, ATM, CDKN2A, FGF19, PIK3CA, RPS6KA3 eta JAK1 mutazio-tasa moderatuak erakusten dituzte. Gene mutanteen funtzioaren azterketak iradokitzen du kromatinaren birmoldaketa, Wnt/β-catenina eta JAK/STAT seinaleen transdukzioan, P53-zelulen zikloaren bidea, aldatzaile epigenetikoak, estres oxidatiboaren bideak, PI3K/AKT/MTOR bidearen eta RAS/RAF/bidearen aldaketak. MAPK kinasaren bideak funtsezko eginkizunak betetzen ditu HCC onkogenesian.32,33 Tumoreekin lotutako mutazioak detektatu ziren ikerketa batean, Huang et al-ek aurkitu zuten ctDNAren menpeko tumoreari lotutako mutazioen maiztasuna % 19,5ekoa zela eta espezifikotasuna % 90ekoa zela. .34 Horrez gain, inbasio baskularra jasan zuten pazienteek ctDNA mutazioak (P=0,041) eta errepikapenik gabeko biziraupen laburragoa (P<0,001) izan zituzten. Gene mutanteen funtzioaren azterketak iradokitzen du kromatinaren birmoldaketa, Wnt/β-catenina eta JAK/STAT seinaleen transdukzioan, P53-zelulen zikloaren bidea, aldatzaile epigenetikoak, estres oxidatiboaren bideak, PI3K/AKT/MTOR bidearen eta RAS/RAF/bidearen aldaketak. MAPK kinasaren bideak funtsezko eginkizunak betetzen ditu HCC onkogenesian.32,33 Tumoreekin lotutako mutazioak detektatu ziren ikerketa batean, Huang et al-ek aurkitu zuten ctDNAren menpeko tumoreari lotutako mutazioen maiztasuna % 19,5ekoa zela eta espezifikotasuna % 90ekoa zela. .34 Horrez gain, inbasio baskularra jasan zuten pazienteek ctDNA mutazioak (P=0,041) eta errepikapenik gabeko biziraupen laburragoa (P<0,001) izan zituzten.Gene mutanteen funtzioaren azterketak iradokitzen du kromatinaren birmoldaketa, Wnt/β-catenina eta JAK/STAT seinaleztapenean, P53 zelula-zikloaren bidea, modifikatzaile epigenetikoak, estres oxidatiboaren bideak, PI3K/AKT/MTOR bidea eta RAS/RAF/MAPK kinasaren bidea jokatzen dutela. rol kritikoa HCC tumorigenesian.32,33 Tumoreekin lotutako mutazioak aurkitu zituen ikerketa batean, Huang et al.aurkitu zuen ctDNA-ren menpeko tumoreari lotutako mutazioen maiztasuna %19,5ekoa zela eta espezifikotasuna %90ekoa zela..34 Кроме Того, у пациентов с сосудией чаще встречались мутации цднк (p = 0,041) eta Более короткая безрецидивная выживаемость (P <0,001). .34 Gainera, inbasio baskularra duten pazienteek cDNA mutazio gehiago (P=0,041) eta gaixotasunik gabeko biziraupen laburragoa izan dute (P<0,001).Gene mutanteen analisi funtzionalak kromatina birmoldatzea, Wnt/β-catenina eta JAK/STAT seinaleztapena, P53 zelula-zikloaren bidea, modifikatzaile epigenetikoak, estres oxidatiboaren bidea, PI3K/AKT/MTOR bidea eta RAS/RAF/MAPK bidea agerian utzi zituen. kinasaren bideek paper garrantzitsua dute HCCren onkogenesian. 32,33 在 一 项 检测 到 肿瘤 相关 突变 的 研究 中, Huang 等 人 发现 肿瘤 相关 突变 依赖于 人 的 频率 为 为 的 的 为 为 为 为 等 为 为 等 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为, 此外, 经历 血管 的 患者 更 有 可能 的 患者 更 有 发生 的 患者 更 可能 发生 的 患者 更 发生 的 患者突变（P=0,041）和更短的无复发生存期（P<0,001）。 32,33 在 一 项 检测 到到 等 发现 相关 相关 突变 依赖于 发现 肿瘤 相关 突变 依赖于 等 发现 的 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 的 的 的 的 的 的 的 的 的 更 更 发生 血管 的 更 更 发生 发生 侵犯 的 更 更 发生 发生 突变 的 的 更 发生 突变 的 的 的 的 的 的短的无复发生存期（P<0,001）。32,33 Tumoreekin lotutako mutazioak aurkitu zituen ikerketa batean, Huang et al.aurkitu zuten tumoreei lotutako mutazioak % 19,5eko mendekotasuna zutela cDNAren arabera, % 90eko espezifikotasuna 34. Gainera, inbasio baskularra jasan zuten pazienteek litekeena zen cDNA garatzea.мутация (P = 0,041) eta более короткая безрецидивная выживаемость (P <0,001). mutazioa (P=0,041) eta gaixotasunik gabeko biziraupen laburragoa (P<0,001).HCC gidariaren beste gene arrunt bat TP53 da, %30etik gorako mutazio-tasa duena.Ikerketek frogatu dute odolean eta gernuan ctDNAn TP53 mutazioen maiztasuna % 5 eta % 60 artekoa dela.35 Johanen ikerketak erakutsi zuen HCC berantiarrean ctDNA mutazio-espektroak HCC goiztiarren antzeko mutazio-tasa duela, TERT sustatzailea (%51), TP53 (%32), CTNNB1 (%17), PTEN (%8), mutazioak barne. AXIN1 ., ARID2, KMT2D eta TSC2 (%6 bakoitza).36 β-catenina (CTNNB1) onkogeneak paper garrantzitsua betetzen du Wnt seinaleztapen-bidean.CTNNB1 transkripzio koaktibatzaileak geneen adierazpena susta dezake, eta horrek zelulen ugalketa, apoptosiaren inhibizioa eta angiogenesia ekar ditzake.CTNNB1ek TERT-ekin ere elkarreragin dezake hepatozitoen eraldaketa eragiteko.33 TERT sustatzailea maiz mutatzen da tumore solido batzuetan.TERT-en aldaketek, HCCren eraldaketa gaiztoan izandako aldaketa genetiko goiztiarrenetako batek, hepatozito zirrotikoetan telomerasa berraktibatzea ekar dezake eta ugaltzea sustatu eta zahartzea prebeni dezakete.33-37 TERT sustatzailearen mutazioak gibeleko nodulu ugaritzaileak eta HCC goiztiarrak dituzten pazienteen % 59-90ean gertatzen direla jakinarazi da eta biziraupenarekin lotuta daude.38
Kopiaren zenbaki aldaketak (CNA) mutazio somatikoen azpimota garrantzitsu bat dira.Ikerketek frogatu dute CNAren zama hedatua eta fokua sinadura genomiko bat dela, minbizi mota batzuetan tumoreen infiltrazio immunologikoa eta bazterketa aurreikusteko gai dena.39 Infiltrazio-seinale aktiboa, jarduera zitolitiko handia, hantura larria eta HCCn antigenoaren aurkezpenarekin lotutako markatzaile genetikoak.477 subjektutan nukleotido bakarreko polimorfismoen datu-matrizearen analisiak CNSn zama baxua agerian utzi zuen.Aitzitik, CNA karga handia duten kromosomiko ezegonkorrak diren tumoreek errefus immunearen zantzuak erakutsi zituzten eta ugalketarekin, DNAren konponketekin eta TP53 disfuntzioarekin lotu ziren.Xu et al.HCC taldeak gibeleko gaixotasun kronikoen taldeak baino CNA puntuazio altuagoak zituela erakutsi zuen.40 Zelula bakar baten genoma osoko sekuentziazioa erabiliz, CNAak hepatokarzinogenesiaren hasieran agertzen dira eta nahiko egonkor mantentzen dira tumorearen progresioan.41 Chung et al.aurkitu zuen cfDNA mailak nabarmen igo zirela HCC pazienteetan eta genoma osoko CNAk cfDNAn marka pronostiko independente garrantzitsu bat zirela sorafenibarekin tratatutako HCC pazienteetan.42 CNA karga handiagoa zuten pazienteek gaixotasunaren progresioa eta heriotza izateko probabilitate handiagoa zuten CNA karga txikiagoa zutenek baino.Ollerich et al.aurkitu zuten kopia-zenbakien ezegonkortasun indizea (CNI) erabil daitekeela minbizi-gaixoen cfDNAn CNA ebaluatzeko.Minbizi aurreratua duten pazienteek kontrol talde batek baino CNI puntuazio nabarmen handiagoak izan dituztela adierazi dute, pazienteen erantzuna kimioterapia sistemikoari eta immunoterapiari baloratzen baitie.43 Emaitza hauek iradokitzen dute biopsia likidoko aleetan aurkitutako CNAk pronostiko adierazle gisa balio dezaketela minbizi aurreratua duten pazienteetan.HCC terapia sistemikoaren atzealdean.
Gaur egun, ctDNA detektatzeko erabiltzen diren metodoak bideratuak eta bideratu gabeko metodoetan bana daitezke.Labur esanda, polimerasaren kate-erreakzio digitala (dPCR), BEAMing digital PCR, Amplification Refractory Mutation System-PCR, Capp-Seq eta Tam-Seq bezalako metodoak oso sentikorrak dira aurrez definitutako geneekiko.Helburuz kanpoko metodoek, esate baterako, genoma osoaren sekuentziazioa eta NGS bezalako paisaia genomiko osoaren ikuspegi integrala eskaintzen dute.44 Xede-panelekin alderatuta, genoma osoko sekuentziazioak mutazio puntualak eta txertaketak ez ezik, berrantolaketak eta kopia-zenbakien aldaerak ere hauteman ditzake.pronostikoa, eta CTC eta cfDNA adierazle onak dira, HCCren jarraipen dinamikorako erabil daitezkeenak.45 Gainera, cfDNA analisia erabilgarriagoa izan daiteke HCC detektatzeko.Yan et al.HCC duten pazienteen plasmako cfDNA gibeleko fibrosia eta kontrol osasuntsuak dituzten pazienteetan baino nabarmen handiagoa zela erakutsi zuten.AFPrekin alderatuta, ctDNA HCC goiztiarraren baheketa-markatzaile hobea izatea espero da.46 Populazio-populazio batean cfDNA eta proteina probatu zituzten 47 biopsia likidoren azterketa prospektibo batean, HCC duten pazienteak HCC ez duten pazienteetatik bereizteko eraginkorrak zirela frogatu zen.331 ultrasoinu paziente normal eta AFP negatiboren jarraipena batean, cfDNAren sentsibilitatea eta espezifikotasuna HCC diagnostikatzeko % 100 eta % 94 izan ziren, hurrenez hurren, beraz, cDNAk HCC detektatu ahal izan zuen HBsAg seropositiborik gabeko gizabanakoetan.Yeo48 azterketan, RASSF1A sustatzailearen hipermetilazio maiztasun handia (% 92,5) aurkitu zen HCC duten pazienteetan.Horrez gain, Xu et al.HCC aurreikusteko diagnostiko-eredu bat sortu zuen, hurrenez hurren, %90,5 eta %83,3ko espezifikotasuna eta sentikortasuna duten metilazio-markatzaile espezifikoen panel bat erabiliz.Panelari esker, HCC duten pazienteak beste gibeleko gaixotasunak dituzten pazienteetatik bereiz daitezke, eta hori AFP baino hobea da.Era berean, proba positiboa izan duten kontrol arruntek HCCrako arrisku-faktoreak izan ditzaketela ikusi dute, hala nola, VHB infekzioa edo alkoholaren erabileraren historia.25 HCCrako arrisku handiko faktoreek cfDNAren hipermetilazioa sustatu dezaketela hipotesia dugu, eta horrek HCCaren progresioan laguntzen duela eta, beraz, cfDNAk funtsezko eginkizuna izan dezake arrisku handiko taldeen baheketan.Cai et al.ctDNA mutazioen sorta osoa laburbildu eta pazienteen tumore-zama ebaluatzeko estrategia sendoa eskaintzen du.49 Estrategia honek tumorigenesia irudien aldaketa baino 4,6 hilabete lehenago identifika dezake eta diagnostiko-errendimendu handiagoa erakutsi du AFP, AFP-L3 eta PIVKA-II serum biomarkatzaileekin alderatuta.cDNA proben diagnostiko-balioa frogatu da irudien ebaluazioa erabilgarri ez dagoenean, beraz, cDNA probak balio du HCC goiztiarraren diagnostikoan arrisku handiko taldeetan.Berriki, zientzialariek NGS teknologia erabili zuten aldagai anitzeko aldakuntza genetikoaren adierazleak (5-hidroximetilzitosina, 5′-motiboa, fragmentazioa, nukleosomaren arrastoa, HIFI barne) 3204 lagin klinikotan eta cfDNAtan aztertzeko.50 Berriz baliozkotutako HIFI modeloek hiru tren, proba eta proba-multzo independenteekin bereizketa egonkorra eta fidagarria erakutsi zuten HCC eta HCC ez diren populazioen artean, % 95,79 eta % 95,42ko sentikortasunarekin, HCCren berariazko proba eta proba multzoetan, hurrenez hurren.Sexuak %95,00 eta %97,83 ziren, hurrenez hurren.HIFI metodoaren balio diagnostikoa AFPrena baino handiagoa da HCC eta zirrosia bereizteko.Horrez gain, ctDNA tratamendu kirurgikoan ere erabiltzen da.Atsushi et al.HCC duten pazienteetan ctDNAren serum-mailak ebakuntza aurreko mailak zehaztu zituen eta cDNA positiboko taldean errepikapen-tasa eta metastasi extrahepatic-tasa nabarmen handiagoak zirela cDNA talde negatiboan baino, eta cDNA mailak nabarmen erlazionatuta zeuden.tumorearen progresioarekin.51 Biomarkatzaile oso sentikorra izanik, ctDNAk HCCk ontziak inbaditzeko duen gaitasuna aurreikus dezake.Wang et al.HCC duten 46 pazienteren genoma osoko sekuentziazioa egin zuen, eta aldagai anitzeko analisiak erakutsi zuen cDNA aldaeraren alelo-maiztasunaren atalasearen balioa % 0,83koa dela mikroontzietan inbaditzeko, sentikortasuna % 89,7koa eta espezifikotasuna % 80.0koa dela.HCC erresekagarrian inbasio mikrobaskularretarako arrisku-faktore independentea, cDNAk tratamendu optimoa bideratzen lagun dezakeela iradokitzen du.Ondorioz, ctDNA erabat inplikatuta dago HCCren agerpenean eta garapenean eta baheketa goiztiarra, ebaluazio kirurgikoa eta gaixotasunaren jarraipena egiteko erabil daiteke.
CTCak tumore primarioetatik edo metastasietatik eratorritako zelula gaiztoak dira, odolera metastasia egiten dutenak.Tumore-zelulek matrizeko metaloproteinasak (MMP) jariatzen dituzte, sotoko mintza hausten dutenak, tumore-zelulak zuzenean odol- eta linfa-hodietara sartzeko.Hala eta guztiz ere, CTC gehienak azkar ezabatzen dira anoikek, immunitate-erasoek edo ebakidura-estresak.53 Epitelio-mesenkimalaren trantsizioa (EMT) CTC-ak tumore primarioko ehunetik erraz isolatzea ahalbidetzen du, kapilarrak inbaditzea eta biziraupena, metastasia, inbaditasuna eta botiken erresistentzia nabarmen hobetzea.Ikerketek frogatu dute heterogeneotasun handia dagoela tumore metastatiko primarioetan tumore-zelulen artean.Horrela, CTC analisiak tumore-zelulen heterogeneotasunaren ulermen integrala ekar dezake.54
HCC-rekin lotutako CTC-en markatzaile espezifikoak honako hauek dira: glipican-3 (GPC3), asialoglycoprotein hartzailea (ASGPR), zelula epitelialen atxikimendu molekula (EpCAM) eta zelula amekin lotutako markatzaileak, hala nola CD44, CD90, 55 eta zelula arteko atxikimendu molekula 1 (ICAM1).) .56 GPC3 markatzailea zelula-mintzean ainguratutako proteina bat da, klinikoki HCCren analisi eta karakterizazio patologikorako erabiltzen dena.57 GPC3-aren adierazpena ohikoagoa da HCC tumore-zeluletan tarteko eta baxuko diferentziazioarekin eta hepatik kanpoko migrazioa sustatzen du;gainera, GPC3+ CTCk egoteak HCC metastasia adierazten du.58 ASGPR hepatozitoen gainazalean soilik adierazten den mintz-transmiko proteina da eta ondo bereiztutako HCCetan oso adierazten da.EpCAM mintzarekin lotutako proteinarik erabilienetako bat da CTCak harrapatzeko.EpCAM zelula amaren ezaugarriak dituzten HCC zelulen gainazal markatzaile gisa identifikatu da,59 eta horrek HCCren hainbat ezaugarri klinikopatologikorekin erlazionatzen du, hala nola, inbasio baskularra, AFP maila ebaluatuak eta Bartzelonako Ospitaleko (BCLC) gibeleko minbiziaren fase aurreratua.60 CTC EMT fenotipoa oso metastasia da.CTCko 54 EMT prozesuek HCC metastasia sustatzen dute.EMT markatzaileen adierazpena, hala nola vimentin, twist, E-box zinc finger binding (ZEB) 1, ZEB2, barraskiloa, barea eta E-kadherina aztertu dira HCC gaixoen gibeletik eratorritako CTCetan.58 Cheng-ek [61] garatutako CanPatrol™ sistemak CTCak hiru azpitalde fenotipikotan sailkatu zituen nagusiki adierazitako markatzaileetan oinarrituta: fenotipo epitelial (EpCAM, CK8/18/19), fenotipo mesenkimala (vimentina, kiribildua) eta fenotipo mistoak.176 pazientetan, CTC osoa AFP baino handiagoa izan zen HCC gibeleko gaixotasun onberarengandik bereizteko.CTC, AFP eta CTC eta AFP guztirako AUC balioak 0,774 (% 95 CI, 0,704-0,834), 0,669 (% 95 CI, 0,587-0,750) eta 0,821 (% 95 CI, 0,756-0,88) izan ziren. ).), hurrenez hurren.EMTn oinarritutako CTC sailkapenak HCC diagnostikoa, errepikapen goiztiarra, metastasia eta denbora orokorra laburragoa aurreikus ditzake.
Gaur egun, CSCak detektatzeko metodoen artean metodo fisikoak eta metodo biologikoak daude.Metodo fisikoak, sarritan propietate biofisikoetan oinarritutako aberastasun gisa aipatzen direnak, batez ere CSCren propietate fisikoen araberakoak dira, hala nola tamaina, dentsitatea, karga, mugikortasuna eta deformagarritasuna.Propietate fisikoen arabera, hainbat metodo daude, hala nola iragazketan oinarritutako sistemak, dielektroforesia... hala nola, EpCAM, ASGPR, giza epidermiko hazkuntza-faktorearen 2 (HER2), prostatako antigeno espezifikoa (PSA), giza panzitokeratina (P-CK) eta carbamoyl phosphate synthase 1 (CPS1).62 Beste mota batek, aberasterik gabeko metodoa izenekoa, fluxu-zitometria erabiltzen du CTCak leukozitoetatik bereizteko, nuklear eta zitoplasmatiko erlazio eta tamaina handiagoan oinarrituta.Gaur egun, CTCak detektatzeko FDAk onartutako proba bakarra Cell-Search™ sistema da, EpCAM zelula gainazaleko markatzailea erabiltzen duena. Hala ere, markatzaileetan oinarritutako CTC detektatzeak positibotasun-tasa areagotu dezake.54 ASGPR eta CPS1-en aurkako antigorputzen nahasketak %91eko CTC detekzio-tasa lortu zuen HCC pazienteetan.63 Zhang et al-ek CTC-Chip bat erabili zuten ASGPR, P-ren aurkako antigorputzak dituena. -CK eta CPS1, eta HCC pazienteak bereizi zituen gibeleko gaixotasun onbera edo ez-HCC minbizia dutenengandik %100eko tasan.64 Wang-en ikerketa batek EpCAM+ CTCak detektatu zituen 42 HCC gaixoen % 60an eta korrelazio esanguratsuak aurkitu zituen positibotasunaren artean. tasa eta TNM etapa duten CTC kopurua.65 Guo et al-ek aurkitu zuten CTCtik eratorritako PCR puntuazioa altua izan zela 125/171 (%73) pazienteetan, zeinen AFP maila <20 ng/mL zuten %72,5eko sentikortasunarekin eta % 95,0ko espezifikotasuna, AFPren % 57,0 eta % 90,0aren aldean, 20 ng/mL-ko ebakiduran.66 AFP eta CTC-en konbinazioak HCC detekzioa hobe dezake.45 Uste da CTC-ek abantaila bat dutela taldeen baheketa goiztiarrean AFPren aldean. HCC izateko arrisku handian. Hala ere, markatzaileetan oinarritutako CTC detektatzeak positibotasun-tasa areagotu dezake.54 ASGPR eta CPS1-en aurkako antigorputzen nahasketak %91eko CTC detekzio-tasa lortu zuen HCC pazienteetan.63 Zhang et al-ek CTC-Chip bat erabili zuten ASGPR, P-ren aurkako antigorputzak dituena. -CK eta CPS1, eta HCC pazienteak bereizi zituen gibeleko gaixotasun onbera edo ez-HCC minbizia dutenengandik %100eko tasan.64 Wang-en ikerketa batek EpCAM+ CTCak detektatu zituen 42 HCC gaixoen % 60an eta korrelazio esanguratsuak aurkitu zituen positibotasunaren artean. tasa eta TNM etapa duten CTC kopurua.65 Guo et al-ek aurkitu zuten CTCtik eratorritako PCR puntuazioa altua izan zela 125/171 (%73) pazienteetan, zeinen AFP maila <20 ng/mL zuten %72,5eko sentikortasunarekin eta % 95,0ko espezifikotasuna, AFPren % 57,0 eta % 90,0aren aldean, 20 ng/mL-ko ebakiduran.66 AFP eta CTC-en konbinazioak HCC detekzioa hobe dezake.45 Uste da CTC-ek abantaila bat dutela taldeen baheketa goiztiarrean AFPren aldean. HCC izateko arrisku handian.Hala ere, markatzaileetan oinarritutako CTCen detekzio konbinatuak emaitza positiboen ehunekoa areagotu dezake.54 ASGPR eta CPS1 antigorputzen aurkako nahasketak %91eko CTC detekzio tasa lortu zuen HCC duten pazienteetan.63 Zhang et al.ASGPR, P-CK eta CPS1-en aurkako antigorputzak dituen CTC-Chip bat erabili zuen, eta HCC duten pazienteak ere bereizten zituen gibeleko gaixotasun onbera edo ez-HCC dutenengandik %100eko tasan.частота и количество ЦОК со стадией TNM.65 Guo и соавторы обнаружили, что показатель ПЦР, полученный из ЦОК, был повышен у 125/171 (73%) пациентов, у которых уровень АФП был <20 нг/мл с чувствительностью 72,5% и специфичность 95,0% по сравнению с 57,0% и 90,0% для АФП при пороговом уровне 20 нг/мл.66 Комбинация АФП и ЦОК может улучшить обнаружение ГЦК.45 Считается, что ЦОК имеют преимущество перед АФП при раннем скрининге групп. TNM etapa duten CTCen maiztasuna eta kopurua.65 Guo et al-ek aurkitu zuten CTCetatik eratorritako PCR-a igo zela AFP maila <20 ng/mL <20 ng/mL zuten 125/171 pazientetan %72,5eko sentikortasunarekin eta espezifikotasunarekin. % 95,0 AFPren % 57,0 eta % 90,0aren aldean, 20 ng/mL-ko ebaki-mailan.66 AFP eta CTCen konbinazioak HCCren detekzioa hobe dezake.45 CTC-ek AFPren aldean abantaila dutela uste da baheketa goiztiarrean. taldeak.HCC izateko arrisku handiarekin.Hala ere, markatzaileetan oinarritutako CTCen detekzio konbinatuak emaitza positiboen ehunekoa handitu dezake.54 ASGPR eta CPS1 antigorputzen aurkako nahasketak % 91eko CTC detektatzeko tasa lortu zuen HCC duten pazienteetan.63 Zhang et al.ASGPR, P-CK eta CPS1-en aurkako antigorputzak dituzten CTC txipak erabili ditu eta HCC duten pazienteak gibeleko gaixotasun onberak eta HCC ez direnak %100ean bereizten ditu.64 Wang-en ikerketak EpCAM+ CTCen % 60 identifikatu zuen 42 HCC pazienteetan eta TNM fasean intzidentziaren eta CTC kopuruaren arteko korrelazio esanguratsua aurkitu zuen. 65 Guo 等 人 发现, 在 AFP 水平 <20 NG / ML 的 125/171 (% 73) 名 患者 中, CTC 衍生 的 PCR 评分 升高, 敏感性 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 而 在 在 在 在 在 截止值为20 ng/mL 时的特异性为% 57,0 和% 90,0. 65 Guo 等 人 发现 在 在 在 水平截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止值 为 截止 截止 截止 截止 截止值 为 截止 截止 截止 截止值 为 为 截止 截止 截止 时 的 特异性 为 57,0% 和% 90,0.65 Guo et al.обнаружили, что у 125/171 (73%) пациентов с уровнем АФП <20 нг/мл показатели ПЦР, полученные с помощью ЦОК, были повышены с чувствительностью 72,5% и специфичностью 95,0%, в то время как АФП на уровне отсечки Специфичность составляла 20 нг/мл. AFP maila <20 ng/mL duten 125/171 (% 73) pazienteetan, CTCtik eratorritako PCR balioak % 72,5eko sentikortasunarekin eta % 95,0ko espezifikotasunarekin igo ziren, eta AFP moztearen espezifikotasunean zegoen bitartean. 20 ng/ml zen.ml %57,0 eta %90,0 izan zen.66 ORP eta CTC konbinazioak HCCren detekzioa hobetzen du.45 CTCak AFP baino handiagoak direla uste da arrisku handiko HCC populazioen baheketa goiztiarran.Horrela, CTC positiboak eta arrisku handiko HCC taldeentzat, CTC probak ohiko ultrasonekin eta AFP detekzioarekin konbinatu behar dira.Hala ere, CTCak tumoreen metastasiaren eta errepikapenaren iragarle garrantzitsutzat hartzen dira, eta CTCak detektatzea ez da modu independentean gomendatzen diagnostiko tresna gisa.62 Hori dela eta, CTCk gaur egun erabiltzen diren beste markatzaile batzuk baino iragarpen biomarkatzaile hobea izan dezake. Zhou et al-ek aurkitu zuten EpCAM+ CTC eta T zelula erregulatzaileen kopuru altua zuten pazienteek HCCren errepikapena garatzeko arrisku handiagoa erakutsi zutela, CTC kopuru txikia zutenek baino, %66,7ko %10.3ko errepikapen-ratioarekin (P <0.001).67 Antzeko ikerketa bat Zhong et al-ek jakinarazi zuten.68 Gainera, Qi-k aurkitu zuen HCC duten 112 pazienteetatik 101 (% 90,81), gaixotasun goiztiarrekoak barne, positiboak zirela CTC-entzat eta HCC nodulu oso txikiak detektatu zirela 3 ondoren. 5 hilabeteko jarraipena. Zhou et al-ek aurkitu zuten EpCAM+ CTC eta T zelula erregulatzaileen kopuru altua duten pazienteek HCCren errepikapena garatzeko arrisku handiagoa erakusten zutela CTC kopuru txikia dutenek baino, % 66,7ko % 10,3ko errepikapen ratioarekin (P < 0,001).67 A. antzeko ikerketaren berri eman zuten Zhong et al.68 Horrez gain, Qi-k aurkitu zuen HCC duten 112 pazienteetatik 101 (% 90,81), gaixotasun goiztiarreko fasea zutenak barne, CTCrentzako positiboak zirela eta HCC nodulu oso txikiak detektatu zirela 3 eta 3-tik aurrera. 5 hilabeteko jarraipena. Чжоу eta др.обнаружили, что у пациентов с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток риск развития рецидива ГЦК был выше, чем у пациентов с низким количеством ЦОК, с коэффициентом рецидивов 66,7% против 10,3% (P <0,001)67. Zhou et al-ek aurkitu zuten EpCAM+ CTC altuak eta T zelulak erregulatzaileak dituzten pazienteek HCC errepikatzeko arrisku handiagoa zutela CTC baxuak dituztenek baino, %66,7ko errepikapen-tasa % 10,3ko (P<0,001)67.Antzeko ikerketa bat egin zuten Zhong et al.68. Horrez gain, Qi-k aurkitu zuen HCC duten 112 pazienteetatik 101 (% 90,81), gaixotasun goiztiarra dutenek barne, CTCak zituela, eta HCC nodulu oso txikiak detektatu zirela 3 eta 5 hilabeteko jarraipenaren ondoren. Zhou 等 人 发现, 与 CTC 数量 较 少 的 患者 相比, EPCAM + CTC 和 调节性 t 细胞 t 细胞 细胞 细胞 细胞 数量 细胞 细胞 调节性 数量 数量 数量 风险 风险 更 数量 数量 的 风险 更 更 高 复发率 为 风险 更 更 数量 分别 为 风险 更 数量 数量 为 风险 风险 数量 数量 为 风险 风险 更 数量 复发 风险 风险 风险 和 数量 风险 风险 风险 风险 数量 数量 风险 风险 风险 数量 复发 风险 Zhou 等 人 发现 与 与 与 数量 少 的 患者 相比, EPCAM + CTC 和 细胞 数量 的 患者 发生 t 细胞 数量 风险 患者, 复发率 分别 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为p <0.001)。。。。。。。。。。。。。。。 Чжоу eta др.обнаружили, что пациенты с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток имели более высокий риск рецидива ГЦК по сравнению с пациентами с меньшим количеством ЦОК, с частотой рецидивов 66,7% и 10,3% соответственно (P <0,001). Zhou et al.aurkitu zuten EpCAM+ CTC eta T zelula erregulatzaileak altxatutako pazienteek HCC errepikatzeko arrisku handiagoa zutela CTC gutxiago dituzten pazienteekin alderatuta, % 66,7 eta % 10,3ko errepikapen-tasekin, hurrenez hurren (P < 0,001).Antzeko ikerketa baten berri eman zuten Zhong et al.68 Gainera, Qi-k aurkitu zuen 112 HCC pazienteetatik 101ek (% 90,81), gaixotasun goiztiarreko pazienteak barne, CTC emaitza positiboak izan zituela eta HCC nodulu oso txikiak aurkitu zituzten 3 bisitaren ondoren.Behaketa 5 hilabetera arte.HBV infekzio kronikoa zuten 12 pazientetan CTCak ere aurkitu zituzten eta 5 hilabeteko epean HCC tumore txikiak aurkitu zituzten 2 CTC-positiboko pazienteetan.69 Horrela, CTCak HCC iragartzeko erabil daitezke, 70 baina ohikoago erabil daitezke biomarkatzaile iragarle gisa.
cfDNA bezala, cfRNA odolera askatzen da hainbat sistemaren bidez.Odol periferikoko molekula hauek jatorriko ehun minbizia adierazten dute.Metodo ez inbaditzaileen bidez detektatutako markatzaileekin alderatuta, cfRNAak dinamikoki erregulatzen dira, ehunen espezifikoak eta ugariagoak dira zelulaz kanpoko ingurunean.HCCn 71 miRNAren (miRNA) garrantzia eta balio diagnostikoa ikerketa askotan jakinarazi da.miRNAak RNA ez-kodetzaile endogenoak (ncRNA) dira, eta hainbat jarduera biologiko molekular erregulatzen dituzte helburuko RNA mezularien (mRNA) itzulpena inhibituz.miRNAak exosometan kapsulatutako gorputz apoptotikoetan kokatzen dira, baina odol periferikoko serum-proteinekin eta lipidoekin ere egonkor lotu daitezke eta HCC ebaluatzeko erabil daitezke.mikroRNAk gibelaren birsorkuntzan, lipidoen metabolismoan, apoptosian, hanturan eta HCCren garapenean parte hartzen dute.72 MiR-21, miR-155 eta miR-221 bezalako miRNA onkogenikoak oso ezagunak dira HCCn.Bereziki, miR-21ek kolagenoaren sintesian funtsezko eginkizuna betetzen du zelulaz kanpoko matrizean eta fibrosian eta hepatokarzinogenesia sustatzen du zelula am hematopoietikoak aktibatzen.72,73 HCC-ko tumore-zapaltzaileen miRNAk miRNA-122, miRNA-29, Let-7 familia eta miRNA-15 familia dira.Let-7 familia RAS familiara zuzendutako tumore-zapaltzaile askoren miRNAz osatuta dago.MiR-15 familiak miR-15a, miR-15b, miR-16, miR-195 eta miR-497 biltzen ditu, mRNA jakin batzuen sekuentzia osagarriak dituztenak.Horrez gain, RNA kodetzaile luzeak (lncRNAs) eta RNA zirkularrak (cirRNAs) ere garrantzitsuak dira HCCren baheketa goiztiarra egiteko.LncRNA-ek ncRNAen klase zabalena adierazten dute, mRNA antzeko ncRNA barne, eta giza gaixotasun askoren patogenian parte hartzen dute.LncRNA-ek funtzio erregulatzailea dute gibeleko mikroingurunean eta gibeleko gaixotasun kronikoan.74 CircRNA-ak ere geneen adierazpenaren erregulazioan funtzio anitzak dituzten ncRNA klase bat dira.Berriki, circRNAak HCCrako diagnostiko tresnatzat hartu dira.
RNA askeak zirkulatzeak egonkortasun nabarmena du, tenperatura, pH eta RNasarekiko erresistentzia barne, eta horrek fnRNA odol periferikotik isolatzea ez da hain aspergarria egiten RNA arazteko metodo estandarrak erabiliz.Gehien erabiltzen diren metodoak NGS, mikroarray eta RT-qPCR dira.NGS-k mikroRNA-ak genoma osoan neurtzeko aukera ematen du.Hala ere, metodo hau garestia da eta analisia ez dago estandarizatua.Aitzitik, RT-qPCR merkea da, azido nukleikoak azkar handitzen ditu eta abantaila ugari eskaintzen ditu, hala nola, sentsibilitate handiagoa, zehaztasun handiagoa, barruti dinamiko zabalagoa eta lagin gutxiago behar izatea.Mikroarrayak miRNA detektatzeko erabiltzen den beste metodo bat dira helburuko miRNAen hibridazio sentikor eta espezifikoan oinarritutako DNA zunda osagarriekin 75, baina mikromatrizen datuen analisiak denbora asko eskatzen du.
MiR-122 eta Let-7 zirkulatzea baliagarria izan daiteke arrisku handiko taldeetan HCC fase goiztiarra diagnostikatzeko, HBVrekin lotutako nodulu premaligno eta hasierako HCC diagnostikatzeko.76 Cai et al.aurkitu zuten Let-7 familiako kideak (miR-92, miR-122, miR-125b, miR-143, miR-192, miR-16, miR-126 eta miR-199a/b) kroniko arriskuan daudela. HCC hepatitisa duten pazienteetan.Let-7 familia ordezko biomarkatzaile eraginkorra izan daiteke C hepatitis kronikoarekin lotutako arrisku handiko taldeetan HCCren garapena aurreikusteko. 77 miR-122-k diagnostiko-zehaztasun handia du HCC goiztiarra detektatzeko gibeleko zirrosia duten pazienteetan.78 MiR-107 zirkulatzen duen seruma HCCaren hasierako faseetan ere ebaluatu da, 79 eta potentzial ona erakutsi du arrisku handiko populazioetan.Zhou et al-ek jakinarazi zuten miRNA panel batek (miR-122, miR-192, miR-21, miR-223, miR-26a, miR-27a eta miR-801) HCC B hepatitis kronikotik (CHB) eta zirrositik bereiz ditzakeela. sentikortasuna %79,1 eta %75 izan zen, eta espezifikotasuna %76,4 eta %91,1, hurrenez hurren.80 HBV-rekin erlazionatutako HCC-n, miR150 mailak nabarmen murriztu zirela HCCrik gabeko HBV paziente kronikoenekin alderatuta (sentsibilitatea % 79,1, espezifikotasuna % 76,5).-224 igo zen HCCn kontrol osasuntsuekin alderatuta, eta azpitaldeen analisiek maila altuagoak erakutsi zituzten HBVrekin lotutako HCC duten pazienteetan.B hepatitisarekin lotutako zirrosi eta HCC pazienteek kontrol ezberdinetan HCC detekta dezaketen zazpi siRNA dituen siRNA sailkatzaile bat identifikatu zuten;Baheketa goiztiarrean AUC tartea AFP boluntarioak baino hobea da.Lau miRNAk (miR-1972, miR-193a-5p, miR-214-3p eta miR-365a-3p) HCC duten pazienteak HCC ez duten gaixoak bereiz ditzaketela aurkitu dute.Bost miRNA gehiegi adierazteko (miR-122-5p, miR-125b-5p, miR-885-5p, miR-100-5p eta miR-148a-3p) HCC, zirrosia eta CHB biomarkatzaileetan HBV infekzio potentzialtzat hartzen dira, batez ere. miR-34a-5p gibeleko zirrosiaren biomarkatzaileak izan daitezke,85 eta arrisku handiko populazioetan HCCren baheketa goiztiarra egiteko biomarkatzaile potentzialak izan daitezke.HCCn gehien ikertutako lncRNA oso aktibatzen da gibeleko minbizian (HULC).Beste ikerketek frogatu dute HCC gaixoetan zirkulatzen duten HULC diagnostiko-markatzaile gisa erabil daitekeela, lncRNA hau oso erregulatuta dagoelako HCC pazienteetan, pertsona osasuntsuekin alderatuta.71,86 Beste lnRNA batzuen artean, LINC00152 lncRNA diagnostiko onenatzat hartzen da, bere AUC, sentikortasun eta espezifikotasun handiagatik.86 Ikerketa batean, LINC00152-ren odol periferikoaren adierazpena pixkanaka handitu zen kontrol osasuntsu arruntetatik CHB eta zirrosia duten pazienteetara, eta, azkenik, altuena izan zen HCCn.HCC duten pazienteen plasman circSMARCA5 adierazpenaren ikerketek HCCren adierazpenaren beherakada progresiboa erakutsi dute, hepatitisetik zirrosi eta minbizi aurreko lesioetaraino.87 ROC kurben analisiak circRNA hauen potentziala baieztatu zuen hepatitisa edo gibeleko zirrosia duten pazienteak HCC dutenengandik bereizteko, batez ere 200 ng/mL-tik beherako AFP mailak dituztenak.Horrez gain, Zhu-k 13.617 RNA zikliko aztertu zituen HBVri lotutako HCC gaixoen plasma laginetan eta baieztatu zuen 6 RNA zikliko desberdin adierazten zirela HCCn eta HBVri lotutako zirrosian, cRNAak onuragarriak izan daitezkeela iradokitzen du.arrisku handiko taldeen baheketa goiztiarra egiteko markatzaileak, hala nola gibeleko gaixotasunekin, esklerosi gaixoekin lotutakoak.88
Exosomak 40-160 nm-ko diametroa duten mintz besikulak dira;zelula barneko besikula anitz zelularen mintzarekin fusionatzen dira eta zelulaz kanpoko matrizean askatzen dira.Osagai aktibo asko dituzte, besteak beste, lipidoak, proteinak, RNA eta DNA, eta funtsezko eginkizuna betetzen dute zelulen arteko komunikazioan, HCC zein HCC ez diren zelulak.89,90 Exosomek HCCren progresioa erregulatzen dute hepatozitoen fibroblastoak eta zelula izardunak, zelula immunologikoak, hepatozito normalak eta HCC zelulak aktibatzen dituzte.91 Tumorearen mikroingurunean, tumore-zelulek exosoma kopuru handia sortzen dute, minbizi-zeluletatik heldu gabeko zeluletara eramaten direnak, eta, aldi berean, onkogenesian, degradazioan eta zelula-seinalean parte hartzen dute.92 Ikerketek frogatu dute exosomak onkogenak zelula normaletara transferi ditzaketela prozesu patologikoetan, tumore-inbasioaren eta metastasiaren mekanismoetako bat izan daitekeela.93 Exosomen papera minbiziaren progresioan dinamikoa eta espezifikoa izan daiteke minbizi-motaren arabera, 89 Exosomak ondoko edo urruneko zelulek barneratu ditzakete zelula hartzaileetan xede-gene anitz erregulatzeko, zelula arteko komunikazio-ioietan eta mikroinguru zelularreko elkarrekintzetan parte hartu dezaketenak. zelulen seinaleztapena eta metabolismoa bideratzen ditu.94 Exosoma zama molekulen ezaugarriak eta aldaketa dinamikoek zuzenean islatzen dituzte gurasoen tumore-zelulen ezaugarriak eta aldaketa dinamikoak,95 hori ere minbiziaren diagnostikoan eta pronostikoan exosomak erabiltzeko oinarria baita, baita minbiziaren aurkako terapiaren erantzun indibiduala aurreikusteko ere. ..96
Exosomak isolatzeko eta aztertzeko laborategiko metodo tradizionalak konplexuak, urrats anitzekoak eta denbora asko behar dira, besteak beste, ultrazentrrifugazioa, iragazketa, tamaina baztertzeko kromatografia, immunoafinitate-arazketa, Western blotting, entzimekin lotutako immunosorbent-ensayoa (ELISA), PCR eta fluxu-analisia.Mikro/nanoteknologia erabiltzen duten sistema miniaturizatuak eta laborategi-on-a-chip plataformak asko garatzen ari dira exosomen in situ isolamendu azkar eta erosoa izateko.Nanopartikulen jarraipenaren analisia (NTA) exosomen tamaina eta kontzentrazioa ezaugarritzeko metodo oso erabilia da, nanopartikula magnetikoak eta polihidroxialkanoatoak bezalako metodoak barne.Metodo mikrofluidiko eta elektrokimikoek exosomak azkar antzeman ditzakete etekin handietan.
Proteina exosomalak markatzaile garrantzitsuak dira HCC diagnostikatzeko.Arbelaizko azterketan, 98 RasGAP SH3 lotzeko proteinaren (G3BP) eta immunoglobulina hartzaile polimerikoaren (PIGR) maila nabarmen igo zen HCCtik eratorritako exosometan, eta bi proteinen ustezko eraginkortasun konbinatua AFPrena baino handiagoa izan zen.Burdinaren gainkarga HCCren garapenean laguntzen duen faktore garrantzitsua da.Tseng-ek jakinarazi zuen hepzidina funtsezko eginkizuna izan dezakeela HCCarekiko erresistentzian.99 HCC gaixoen sueroetatik eratorritako exosomek hepzidinaren mRNA aldaeren kopia kopuru nabarmen handiagoa izan zuten haien kontrako osasuntsuek baino, eta horrek iradokitzen du hepzidina HCCrako diagnostiko biomarkatzaile berri bat izan daitekeela.100 HCC-k ekoitzitako exosometan 14-3-3ζ proteinak T zelulen aktibazioa, ugalketa eta bereizketa murrizten ditu eta T zelulak T zelula erregulatzaileetan eraldaketa eragin dezake, T zelulak agortzea eraginez.101 Hau babestuta dago zaintza immunologikotik tumoreen ihesa ikertzen duten hainbat ikerketek, 102 eta horrek HCC tumorigenesian lagundu dezake.
Plasman edo serumean ecRNA egoteaz gain, RNAz aberastutako exosomak tumoreen baheketa goiztiarrean denbora errealean eszenatze ez inbaditzailerako erabil daitezke eta tumorearen bilakaera eta terapiaren erantzuna zehazteko.HCC taldean miRNA-21 exosomal-maila odol-serumaren maila CHB taldean baino 2,21 aldiz handiagoa izan zen, eta HCC taldean biztanleria osasuntsuan baino 5,57 aldiz handiagoa.Wang ikerketan, exosomek nabarmen handitu zuten HCC 0,83 (% 95 CI 0,74-0,93) eta 0,94 (% 95 CI 0,88-1,00) AUC balioak dituzten paziente zirrotikoekin alderatuta.104 Lortutako datuek argitu zuten karga exosomiko molekula espezifikoek onkogenesiaren eta HCCren progresioaren erregulazioan duten inplikazioa.105 MiR-221, miR-103, miR-181c, miR-181a, miR-93 eta miR-26a-ren serum adierazpena koherentea da.eta metastasia, eta miR21 mailak HCC pazienteetan kontrol osasuntsuetan baino askoz ere handiagoak ziren eta CHB gaixoetan ere.102 LncRNA-k diagnostiko-balio potentziala zuen HCCn.Ikerketek frogatu dute HCC gaixoen sueroetatik eratorritako exosomek LINC00161, LINC000635 eta lncRNA maila nabarmen handiagoak dituztela hazkuntza-faktore-β eraldatuz HCCrik gabeko pazienteetan baino, eta lncRNA hauek TNM fasearekin eta tumore-bolumenarekin oso lotuta daude.110 Conigliaro et al.CD90+ exosomak lncRNAH19 maila altua adierazten zuela aurkitu zen, eta horrek nabarmen handitu zuen hazkuntza-faktorea baskularra (VEGF) askapena eta VEGF-R1 hartzaileen ekoizpena, eta horrela angiogenesia estimulatzen zuen.93 CircRNA-ak beste ncRNA exosomiko mota bat dira - espezieen artean maila baxuago baina egonkorretan adierazita, circRNA-ek zelula-motaren, ehun-motaren, garapen-fasearen eta jarduera erregulatzaileen espezifikotasuna ere erakusten dute.111 circRNA minbizi goiztiar eta gutxieneko inbaditzaileen biomarkatzaile diagnostikoak dira.112 Azken entsegu klinikoek erakutsi dute miRNA indibidualen espezifikotasuna HCC iragartzeko ez dela aproposa.Hori dela eta, saiakuntza anitz erabiliz detekzio konplexuak (adibidez, miR-122 eta miR-48a AFPrekin konbinatuta) HCC goiztiarraren identifikazioa eta HCCa zirrosiaren bereizketa hobe dezake.100
CHB eta gibeleko zirrosia duten pazienteak dira HCC garatzeko arrisku handiko talderik ohikoena.Arrisku handiko taldeentzat, erantzun birologiko iraunkor bat lortu ondoren, HCC arriskuan oinarritutako zaintza-estrategia kostu-eraginkorra garatu behar da, eta baheketa goiztiarra da HCC-ren diagnostikoa eta tratamendua hobetzeko kostu-eraginkortasun-ratio altuarekin2. ..Minbiziaren baheketa goiztiarreko metodoek muga asko dituzte: baheketa goiztiar metodo eraginkorrak ez dira garatu minbizi mota gehienetarako, eta atxikimendua baxua izan ohi da.Hasierako baheketa metodo tradizionalekin alderatuta, biopsia likidoaren teknologiak abantaila nabariak ditu: laginak hartzeko erraztasuna, panrac detektatzeko, laginaren erreproduzigarritasun ona eta tumorearen heterogeneotasunarekiko erantzun eraginkorra.Biopsia likidoarekin lotutako metodoen kostu-eraginkortasuna kontuan hartuta, HCC baheketan erabiltzea ez da ohiko probatu.Maila molekularrean detekzio zehatzean aurrera egin arren, fluidoen biopsia kosta egiten da xede pazienteetan HCC antzematea, bere erabilera hedatua mugatuz, ultrasoinuak eta erresonantzia magnetikoko irudiak bezalako irudi-prozedura zehatzekin alderatuta.113,114 Hala ere, aurreko ikerketa batek frogatu zuen biopsia likidoak onura handia erakutsi zuela kalitate-egokitutako bizi-urteei (QALY) dagokionez.115 Biopsia likidoaren onurak urdaileko eta nasofaringearen kartzinoma goiztiarrean ere erakutsi dira.116,117 Gaur egungo iritzia da biopsia likidoak serum biomarkatzaileak eta baheketa erradiologikoa osatu ditzakeela tumoreak detektatzeko eta diagnostikatzeko.117 118
Gaur egungo literaturaren arabera, fluidoen biopsiaren teknologiak sentikortasun eta espezifikotasun nabarmen handiagoak erakutsi ditu gibeleko minbizia izateko arrisku handiko taldeen baheketa goiztiarrean.Fluido-biopsia mota edozein dela ere, HCC arrisku handiko gizabanakoetatik HCCrik gabeko pertsonengandik bereiz dezake, eta baheketa goiztiarraren garrantzia iradokitzen du, arrisku handiko pertsonen eta osasuntsuen arteko desberdintasunak nabariak baitira.ctDNAk erdi-bizitza laburra du eta HCC detektatzeko erabil daiteke; beraz, tumoreetatik eratorritako cDNAren aldaketak denbora errealean tumorearen progresioaren froga zehatzak eman ditzake, batez ere tumore txikietan.ctDNA maila altu batek minbiziaren garapena eta hedapena adierazten du eta progresioaren eta errepikapenaren adierazle goiztiarra da.Gainera, ctDNAren emaitzetan oinarrituta, pazienteek tratamendu eta jarraipen indibidualizatua jaso dezakete.119 Metilazio gune espezifikoak AFP baino markatzaile hobeak izan daitezke HCC eta nodulu zirrotikoak goiz identifikatzeko.HCC erresekagarrien kasuetan, cDNA maila altuak inbasio mikrobaskularren eta ebakuntza osteko errepikapenaren eta metastasiaren adierazgarri dira.Kopiaren kopuruaren aldaketak HCC duten pazienteen biziraupenarekin lotuta daude.Onar daiteke cDNA ebaluazioak HCCren tratamendu orokorrean parte hartu dezakeela, eta cDNA modulazio terapeutikoaren adierazle eraginkor gisa balio dezake.ctDNAko mutazio genetiko espezifikoetan oinarritutako markatzaileak hartu dituzte gidalerro klinikoek eraginkortasuna aurreikusteko eta botiken erresistentzia kontrolatzeko.ctDNA probak biopsia likidoko tresna baliagarriena izan daitezke baheketa goiztiarra egiteko.CTCek ere funtsezko zeregina dute arrisku handiko HCC taldeen baheketa goiztiarrean.HCCri lotutako CTCen hainbat markatzaile garrantzi berezia dute HCCren agerpenean, garapenean eta errepikapenean.Mintz besikulak diren heinean, exosomak zelulen arteko komunikazioetan parte hartzen dute, batez ere HCC zeluletan.MikroRNA zirkulatzaileak egonkorrak dira odolean eta, beraz, baliagarriagoak izan daitezke HCCren baheketa goiztiarra egiteko.Pixkanaka, proteina exosomalak eta RNAn aberatsak diren exosomak aurkitu ziren, eta HCCrako duten eraginkortasun iragarlea baieztatu zen.Interesgarria da HCCren etiologia desberdinak mutazio ezberdinekin ere lotu daitezkeela, beraz, biomarkatzaile desberdinak hauta ditzakegu baheketa goiztiarra egiteko, HCCren etiologia ezberdinetan oinarrituta.120
Hala ere, egungo fluido-biopsiaren teknikak zalantzazkoak dira egonkortasunari dagokionez eta ezin dute HCCren baheketa goiztiarra edo monitorizazioa modu independentean egin, baina banakako baheketa eta diagnostikoa osatu dezakete.121 Biopsia likido gisa, ctDNA, CTC, cfRNA eta exosomekin lotutako AFP edo PIVKA-II detektatzeak eta irudiak aplikazio itxaropentsuak ditu HCCren diagnostiko goiztiarra eta pronostikoan.Hala ere, ctDNA odolera askatzeko mekanismo zehatza argitu gabe dago.ctDNAren oinarrizko propietate biologikoak agerian uzteak erraztu dezake markatzaile gisa erabiltzea.Zirkulazioan ctDNA kopuru txikia eta laginak maneiatzeko baldintza zorrotzak erronkak dira HCCn cDNA detektatzeko inplementazio klinikorako.Gainera, mutazio genetikoek ez dute kartzinogenoen identifikazio zehatza ahalbidetzen duten ezaugarri espezifikorik.Ehun arruntetan aldaera genetiko eta somatiko anitz daudenez, fluidoen biopsiak identifikatutako mutazio genetikoek erabilgarritasun mugatua izan dezakete HCCren baheketa goiztiarrean.122 CDNA tumorea ez den DNA bereizten laguntzen duten gene-helburu erabilgarriak eta biomarkatzaile ondo definitutako mugak dira cDNAren erabileran gai garrantzitsuenak.CTCak detektatzeko markatzaile sentikor eta espezifikoen erabilgarritasun falta.Potentzial metastasia duten zelula bideragarriak baino ez ziren aurkitu, eta CSC aberastutako markatzaileen konbinazio optimoa ez zegoen argi.Kulturarako CTCak isolatzea eta haien mutazio-profilen ebaluazioa ere erronka bat da.Exosomen identifikazio, isolamendu eta arazteko arazoak direla eta, mekanismo molekular espezifikoa oraindik ez dago argi, eta exosomen eta HCCren mekanismoari buruzko aurreko ikerketak ez dira sakonak izan, eta miRNA, lncRNA eta proteinak exosometan ordenatzeko modua. , eta ez dago argi exosomaren hartzea prozesu mota espezifiko bat den.HCCren diagnostiko eta tratamendurako exosomen erabilera fase preklinikoan dago oraindik.Biopsia likidoko prozeduren estandarizazio faltak, esate baterako, odola biltzeko erabiltzen diren hodi motak, odol-bolumena, laginak biltegiratzeko eta detektatzeko, isolatzeko eta aberasteko, ohiko praktika klinikoan erabiltzea eragotzi dezake mediku zentroen arteko praktiken desberdintasunak direla eta.Biopsia likidoaren eraginkortasuna HCCren baheketa, diagnostiko, eraginkortasun-ebaluazio eta iragarpen goiztiarrean aztertzeko dago, batez ere arrisku handiko taldeentzat.Biopsia likidoaren teknologiak potentzial handia du eta etorkizun hurbilean gibeleko minbiziaren praktika klinikoan oso erabilia izatea espero da.
1. Sung H., Furley J., Siegel RL et al.Minbiziaren Estatistika Globala 2020: GLOBOCANek 185 herrialdetako 36 minbizi motaren intzidentzia eta hilkortasuna kalkulatzen ditu.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660
2. Osasun Batzorde Nazionalaren egoitza.Gibeleko minbizi primarioa diagnostikatzeko eta tratatzeko irizpideak (2022ko edizioa) [J].Gibeleko gaixotasun klinikoen aldizkaria, 2022, 38 (2): 288-303.doi: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.02.009
3. Zhou J, Sun H, Wang Z, et al.Hepatozelularen kartzinoma diagnostikatzeko eta tratatzeko jarraibideak (2019ko edizioa).Gibeleko minbizia.2020;9(6):682-720.doi: 10.1159/000509424
4. Kokudo N, Takemura N, Hasegawa K, et al.Kartzinoma hepatozelularentzako praktika klinikoko jarraibideak: Gibeleko Gaixotasunen Japoniako Elkartea, 2017 (JSH-HCC 4. jarraibideak), 2019ko eguneraketa.Gibeleko Gaixotasun Biltegia.2019;49(10):1109–1113.doi:10.1111/hepr.13411
5. Barrera-Saldana HA, Fernandez-Garza LE, Barrera-Barrera SA Biopsia likidoa gibeleko gaixotasun kronikoan.Ann Hepato.2021;20:100197.doi:10.1016/j.aohep.2020.03.008
6. Tai TKYu., Tan P.Kh.Bularreko minbiziaren biopsia likidoa: berrikuspen bideratua.Arch Pathol Lab Med.2021;145(6):678–686.doi: 10.5858/arpa.2019-0559-RA
7. Kanval F., Singal AG Kartzinoma hepatozelularentzako zaintza: egungo praktika onak eta etorkizuneko norabideak.Gastroenterologia.2019;157(1):54-64.doi:10.1053/j.gastro.2019.02.049
8. European Research Association L, European Organization R, C Therapeutics.Gida klinikoak EASL-EORTC: kartzinoma hepatozelularen tratamendua.J Heparina.2012;56(4):908–943.doi:10.1016/j.jhep.2011.12.001
9. Zhang G., Ha SA, Kim HK et al.AFP eta HCCR-1en analisi konbinatua markatzaile serologiko baliagarri gisa kartzinoma hepatozelular txikian: kohorte-azterketa prospektiboa.Dis Mark.2012;32(4):265–271.doi: 10.3233/DMA-2011-0878
10. Chen S, Chen H, Gao S, et al.MicroRNA-125b plasmaren adierazpen diferentziala B hepatitisaren birusarekin lotutako gibeleko gaixotasunean eta B hepatitisaren birusak eragindako kartzinoma hepatozelularren diagnostiko-potentziala.Gibeleko gaixotasunen biltegia.2017;47(4):312-320.doi:10.1111/hepr.12739
11. Halle PR, Foster F., Kudo M. et al.Alfa-fetoproteinaren biologia eta garrantzia hepatozelularen kartzinoma.Gibel int.2019;39(12):2214–2229.doi: 10.1111/liv.14223
12. Omata M, Cheng AL, Kokudo N, et al.Asia-Pazifiko eskualdeko kartzinoma hepatozelularra tratatzeko jarraibide klinikoak: 2017ko eguneraketa.Gibeleko Gaixotasunen Nazioarteko Erakundea.2017;11(4):317–370.doi: 10.1007/s12072-017-9799-9
13. Xu Fei, Zhang Li, He Wei et al.PIVKA-II serumaren balio diagnostikoa bakarrik edo AFPrekin konbinatuta kartzinoma hepatozelularra duten paziente txinatarretan.Dis Mark.2021;2021:8868370.doi: 10.1155/2021/8868370
14. Durin L., Praradines A., Basset S. et al.Zelula txikietako biriketako minbizia ez-plasmatikoko fluido humoralaren biopsia: tumoretik gertuago!zelula.2020;9(11).doi: 10.3390/cells9112486
15. Mader S, Pantel K. Biopsia likidoa: egungo egoera eta etorkizuneko perspektibak.Tratamendua Oncol Res.2017;40(7-8):404-408.doi: 10.1159/000478018
16. Palmirotta R, Lovero D, Cafforio P, et al.Likidoan oinarritutako minbiziaren biopsia: diagnostiko-tresna multimodala onkologia klinikoan.Adv Med Oncol.2018;10:1758835918794630.doi: 10.1177/1758835918794630
17. Mandel P., Metais P. Azido nukleikoak giza plasman.CR Seances Soc Biol Fil.1948;142(3-4):241-243.
18. Mouliere F, Chandrananda D, Piskorz AM, et al.Tumorearen DNA zirkulatzailearen detekzio aurreratua zatien tamainaren analisiaren bidez.Zientziak medikuntza itzultzen du.2018;10:466.doi:10.1126/scitranslmed.aat4921
19. Underhill HR, Kitzman JO, Hellwig C. et al.Tumorearen DNA zatiaren luzera zirkulatzailea.PLOS geneak.2016;12(7):e1006162.doi:10.1371/journal.pgen.1006162
20. Cheng F, Su L, Qian C. Tumorearen DNA zirkulatzailea: likidoan oinarritutako minbiziaren biopsian biomarkatzaile itxaropentsua.xede tumorea.2016;7(30):48832–48841.doi:10.18632/oncotarget.9453
21. Bettegovda S., Sauzen M., Leary RJ et al.Tumorearen DNA zirkulatzailea detektatzea giza gaiztoen fase goiztiar eta berantiarretan.Zientziak medikuntza itzultzen du.2014;6(224):224ra24.doi:10.1126/scitranslmed.3007094
22. Mehes G. Biopsia likidoa minbizi solidoaren analisi iragarle mutazionalerako: patologo baten ikuspegia.J Bioteknologia.2019;297:66-70.doi: 10.1016/j.jbiotec.2019.04.002
[PubMed] 23. Lenarts L, Tuveri S, Yatsenko T, et al.Tumorearen detekzio goiztiarra plasmako DNAren baheketa bidez: hype ala itxaropena?Belgikako zuzenbide klinikoa.2020;75(1):9-1 doi:10.1080/17843286.2019.1671653
24. Nishida N. Hepatitisaren birusaren eta zahartzearen eragina DNAren metilazioan giza hepatokarzinogenesian.Histopatologia.2010;25(5):647–654.doi: 10.14670/HH-25.647